Quan manipuleu microorganismes, és important utilitzar correctament la tècnica asèptica, tant per evitar que els vostres microorganismes es contaminin per forces externes, com per protegir-vos a vosaltres mateixos i a les persones que us envolten.
Passos
Pas 1. Protegiu-vos
Lligueu-vos els cabells llargs i porteu-vos una bata de laboratori i ulleres de protecció.
Pas 2. Renteu-vos les mans i l’espai de treball
Renteu-vos les mans amb aigua i sabó i ruixeu-los al banc amb un 70% d’etanol.
Pas 3. Dissenyeu tot el vostre equip
Assegureu-vos de tenir-ho tot a punt abans de començar.
Pas 4. Engegueu el cremador bunsen el més alt possible
El necessitareu per esterilitzar el vostre equip i la corrent ascendent evita que els contaminants externs aterrin al vostre cultiu.
Gireu el coll per tal que el flux d'aire estigui completament obert
Pas 5. Esterilitzeu el bucle d'inoculació
Mantingueu-lo en un angle aproximadament de 45 ° cap avall i moveu-lo lentament a través de la flama de manera que quedi brillant i vermell-blanc.
- És més fàcil mantenir el bucle entre el dit polze i el punter i recolzar-lo amb el dit mitjà.
- La part més calenta de la flama es troba just a la punta del con interior de foc blau.
Pas 6. Utilitzeu l'altra mà per agafar la vostra cultura original
- Si es tracta d’un plat, manteniu-lo i obriu la tapa amb prou manetes perquè el bucle hi quedi a dins.
- Si es tracta d’un tub amb tapa, utilitzeu el dit rosat de la mà amb què sostingueu el bucle d’inoculació per treure la tapa i arrossegueu ràpidament l’obertura del tub a la flama del cremador de bunsen dues vegades. D’això s’anomena flama i mata qualsevol cosa que vulgui entrar al tub i crea un corrent de convecció que força l’aire a sortir del tub perquè res no pugui aconseguir-ho. Seguiu aferrant-vos a la tapa amb el vostre color rosa durant el següent pas.
Pas 7. Inocular
Toqueu el bucle d'inoculació a la colònia que vulgueu recollir. Si inoculeu a partir de brou líquid, submergeu el bucle d’inoculació al tub i sacsegeu-lo per assegurar-vos que obtingueu prou bacteris.
Pas 8. Tanqueu la cultura original
Si es tracta d’un plat, tanqueu la tapa i torneu-la a col·locar. Si es tracta d’un tub, arrossegueu l’obertura per la flama del cremador bunsen dues vegades i torneu a col·locar la tapa.
Pas 9. Obriu la nova placa
Com abans, utilitzeu la mà lliure per obrir la tapa amb prou amplada com per fer entrar el bucle
Pas 10. Placa els bacteris
Feu lliscar lleugerament el bucle d’inoculació sobre la superfície, tenint cura de no penetrar a l’agar.
Un patró de ratlles comú és el mètode del quadrant
Pas 11. Tanqueu la placa
Pas 12. Esterilitzeu el bucle d’inoculació
Com abans, mantingueu-lo en un angle cap avall de 45 ° i moveu-lo lentament a través de la flama perquè es posi en blanc i vermell.
Consells
- En general, els guants no són necessaris. Tots els passos anteriors serveixen per protegir-vos a vosaltres mateixos i als vostres bacteris, de manera que el risc de contaminació és molt baix. Els guants poden provocar cremades desagradables si els toqueu accidentalment amb el bucle d’inoculació en calent.
- Tingueu en compte que esteu treballant amb foc. No és un gran problema, només assegureu-vos que sabeu què fer si us cremeu; atureu l’experiment, esbandiu la crema amb aigua i, si cal, notifiqueu-ho al vostre supervisor.
- Si feu diverses proves d’haver d’utilitzar la tècnica asèptica, no cal apagar completament el cremador de bunsen entre les tirades; només cal que baixeu fins a la flama pilot i només l’apagueu completament quan hàgiu acabat completament.
